Оцените презентацию от 1 до 5 баллов!
Тип файла:
ppt / pptx (powerpoint)
Всего слайдов:
12 слайдов
Для класса:
1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11
Размер файла:
185.13 kB
Просмотров:
66
Скачиваний:
0
Автор:
неизвестен
Слайды и текст к этой презентации:
№1 слайд
Содержание слайда: Лабораторная работа №3
Определение содержания гемоглобина по методу Сали
№2 слайд
Содержание слайда: Оборудование и реактивы
- гемометр Сали,
- капиллярная пипетка от гемометра Сали,
- глазная пипетка,
- стеклянная палочка,
- часовое стекло,
- 0,1 н. раствор соляной кислоты,
- дистиллированная вод,
- фотоэлектроколориметр (ФЭК) или спектрофотометр с зеленым светофильтром и кюветами
толщиной 1 см;
- химические пробирки с пробками;
- капиллярная пипетка от гемометра Сали объемом 20 мкл;
- градуированная пипетка на 5 мл;
- раствор Драбкина.
№3 слайд
Содержание слайда: Гемоглобин - это дыхательный пигмент, содержащийся в эритроцитах. Его количество в организме выражается в г/л и имеет важное диагностическое значение. Определять содержание гемоглобина можно двумя способами: по Сали и цианметгемоглобиновым методом.
Гемоглобин - это дыхательный пигмент, содержащийся в эритроцитах. Его количество в организме выражается в г/л и имеет важное диагностическое значение. Определять содержание гемоглобина можно двумя способами: по Сали и цианметгемоглобиновым методом.
Наиболее распространенным и простым является метод определения гемоглобина по Сали. Однако он дает ряд объективных (постепенное усиление окраски) и субъективных (визуальное сравнение цвета) ошибок.
Цианметгемоглобиновый метод является наиболее точным.
№4 слайд
Содержание слайда: Метод определения гемоглобина по Сали
Приготовление 0,1 н. раствора соляной кислоты:
- на 1 л дистиллированной воды добавляют химически чистой 8,2 куб. см соляной кислоты с удельным весом 1,19 либо 0,1 н. фиксанал соляной кислоты.
№5 слайд
Содержание слайда: Ход определения и учет результатов
В градуированную пипетку гемометра Сали до метки "2" глазной пипеткой наливают децинормальный раствор соляной кислоты.
В капиллярную пипетку от гемометра Сали набирают кровь до метки 20 мкл и выдувают ее в раствор соляной кислоты.
Полученную смесь перемешивают стеклянной палочкой и оставляют на 10 минут. По истечении этого времени в пробирку по каплям доливают дистиллированную воду и, перемешивая стеклянной палочкой, подбирают цвет рабочего раствора до совпадения с цветом жидкости в стандартных пробирках.
Количество гемоглобина отсчитывают по нижнему мениску рабочего раствора на градуированной пробирке (показатели в г % выражают в г/л), 1 г % равен 10 г/л.
№6 слайд
Содержание слайда: Цианметгемоглобиновый фотометрический метод
Приготовление раствора Драбкина, на 1 л реактива берут:
Бикарбонат натрия - 1 г, красная кровяная соль - 0,2 г, цианистый калий или натрий - 0,05 г,
дистиллированная вода - остальной объем.
№7 слайд
Содержание слайда: Ход определения и учет результатов
Мерной пипеткой в пробирку наливают 5 мл трансформирующего раствора Драбкина. Пипеткой от гемометра Сали добавляют 20 мкл крови.
Содержимое пробирки хорошо перемешивают и оставляют в холодильнике на 20 минут. По истечении этого времени рабочий и трансформирующий растворы наливают в кюветы и, используя зеленый светофильтр, проводят измерения на ФЭКе.
Расчет концентрации гемоглобина (г/л) на основе данного определения проводят по формуле:
Х = х 367,1 г/л, где:
- показания ФЭК;
367,1 - коэффициент пересчета, учитывающий разведение крови, миллимолярный вес гемоглобина и другие показатели.
№8 слайд
Содержание слайда: Определение гематокритной величины
Гематокритное число - это отношение объема эритроцитов к общему объему крови, выраженное в л/л (1 л/л равен 100%).
1. Подготовка к исследованию
Приготовление растворов антикоагулянта:
- раствор Геллера и Пауля:
на 100 мл воды: щавелевокислый аммоний - 1,2 г, щавелевокислый калий - 0,8 г;
- 5% раствор трехзамещенного лимоннокислого натрия.
№9 слайд
Содержание слайда: 2. Ход определения и учет результатов
Микрокапилляры предварительно обрабатывают одним из растворов антикоагулянта. Можно несколько раз сполоснуть их раствором гепарина и высушить при комнатной температуре или же в капилляры насасывают на 1/10 часть раствора Геллера и Пауля и высушивают в сушильном шкафу при 60 °С.
В подготовленные таким образом капилляры набирают кровь. Конец капилляра закупоривают с помощью замазки и ставят центрифугировать до получения постоянного объема эритроцитов. Время центрифугирования зависит от скорости вращения центрифуги.
Достигают эффекта полного осаждения эритроцитов. Отсчет объема эритроцитов и плазмы производят при помощи миллиметровой линейки.
Процентное отношение столба эритроцитов к высоте всего столба крови является гематокритной величиной, которое переводят в размерность л/л.
№10 слайд
Содержание слайда: Определение белка в сыворотке крови
Содержание белка в сыворотке крови рыб служит экспресс-тестом для определения уровня физиологического состояния рыб при выращивании в современных рыбоводных хозяйствах.
Концентрацию белка выражают в г % или в г/л; 1 г/л равен 10 г %.
№11 слайд
Содержание слайда: Ход определения и учет результатов
2 - 3 мл крови помещают в подготовленные уленгутки или небольшие пробирки. После этого кровь центрифугируют 5 минут при 3000 об./мин.
В случае отсутствия центрифуги проводят отстаивание крови в холодильнике 30 - 45 минут. Полученная после центрифугирования или отстаивания сыворотка отсасывается чистой пастеровской пипеткой и несколько ее капель помещают на пластинку рефрактометра. Регистрируют показатель преломления по его шкале.
По таблице 1, приведенной ниже, определяют содержание белка в сыворотке крови. После каждого исследования обе поверхности призм протирают марлевым тампоном, смоченным в спирте.
№12 слайд
Содержание слайда: Концентрация белка (в г %)
при различном показателе преломления