Презентация Бумажная и тонкослойная хроматография онлайн

Содержание слайда: Тема: Бумажная и тонкослойная хроматография Выполнила - Калиева Аида, фарм 203 группа Проверила: Арыстанова Т.А.

Содержание слайда: Глоссарий. Неподвижная фаза – элюент, твердый носитель, покрытый пленкой; Подвижная фаза - поток жидкости, флюида или газа, перемещающий компоненты разделяемой смеси вдоль неподвижной фазы. Сорбция – явление концентрирования вещества в одной из смежных фаз. Адсорбция – концентрирование вещества (жидкости или газа) на поверхности твердой фазы. Абсорбция – поглощение вещества (газа или жидкости) жидкостью. Сорбенты  — твердые тела или жидкости, избирательно поглощающие (сорбирующие) из окружающей среды газы, пары или растворённые вещества. Элюирование – это извлечение вещества, вымыванием его подходящим растворителем – элюентом.

Содержание слайда: Служит для идентификации и количественного определения органических и неорганических веществ. Хроматографическим методом называется такой физико-химический метод разделения смесей, который основан на различном распределении компонентов между двумя фазами – неподвижной (носитель) и подвижной (элюент).

Содержание слайда: По способу разделения компонентов анализируемой смеси и аппаратурного оснащения

Содержание слайда:

Содержание слайда: По направлению движения подвижной фазы различают три способа хроматографии – круговой, нисходящий, восходящий.

Содержание слайда: Разделение многокомпонентных смесей.

Содержание слайда: Скорость перемещения вещества на хроматограмме оценивают по относительной величине удерживания. Rf=расстояние от стартовой линии хроматограммы до центра пятна вещества/расстояние пройденное фронтом подвижной фазы RS= Rf(анализируемого вещества)/ Rf(стандартного вещества)

Содержание слайда: Выявление зон адсорбции (пятен) веществ на хроматограмме производится: Визуально, если вещества образуют окрашенные зоны; С помощью УФ – света, если вещества флуоресцируют; С помощью детектирующих реактивов – по образованию окрашенных зон.

Содержание слайда: Идентификация. Основное пятно на хроматограмме, полученное для испытуемого раствора, сравнивают визуально с соответствующим пятном на хроматограмме, полученной для раствора стандартного образца (раствора сравнения), сравнивая окраску (цвет флюоресценции), размер и относительную величину удерживания обоих пятен.

Содержание слайда: Воспроизводимость результатов достигается стандартизацией факторов:

Содержание слайда: Восходящая хроматография Оборудование состоит из стеклянной камеры с плотно закрывающейся крышкой. В верхней части камеры имеется специальное устройство, удерживающее в подвешенном состоянии хроматографическую бумагу и способное опускать ее при закрытой камере. На дно камеры помещают лодочку с подвижной фазой, в которую опускают конец бумаги. Хроматографическую бумагу разрезают в направлении ее текстуры на полосы достаточной длины и шириной не менее 25 см

Содержание слайда: Лодочку заполняют подвижной фазой до образования слоя глубиной 2.5 см. В соответствии с указаниями в частной статье внутренние стенки камеры выстилают фильтровальной бумагой, импрегнированной подвижной фазой. Для насыщения камеру закрывают и выдерживают в течение 24 ч при температуре от 20 °С до 25 0C Камеру термостатируют при данной температуре в течение всего испытания. Лодочку заполняют подвижной фазой до образования слоя глубиной 2.5 см. В соответствии с указаниями в частной статье внутренние стенки камеры выстилают фильтровальной бумагой, импрегнированной подвижной фазой. Для насыщения камеру закрывают и выдерживают в течение 24 ч при температуре от 20 °С до 25 0C Камеру термостатируют при данной температуре в течение всего испытания. Отступив от края 3 см, на хроматографической бумаге карандашом проводят горизонтальную линию (линия старта), на которую микропипеткой наносят раствор в соответствии с описанием в частной статье. Поскольку диаметр пятна не должен превышать 10 мм, большой объем раствора наносят в несколько приемов, позволяя каждой порции высохнуть перед следующим нанесением. При совместном хроматографировании нескольких растворов расстояние между пятнами на линии старта должно быть не менее 3 см. Бумагу помещают в камеру, последнюю закрывают крышкой и выдерживают в течение 1 ч 30 мин. Затем конец полосы бумаги опускают в подвижную фазу таким образом, чтобы она не касалась нанесенного пятна. Хроматографируют в течение времени или до расстояния, указанным в частной статье. Бумагу вынимают из камеры, сушат на воздухе. Хроматографическую бумагу защищают от яркого света в течение всего процесса разделения.

Содержание слайда: Нисходящая хроматография Оборудование состоит из стеклянной камеры с плотно закрывающейся крышкой. В центре крышки должно быть отверстие диаметром около 1.5 см, закрытое тяжелой стеклянной пластиной или пробкой. В верхней части камеры подвешивают лодочку для растворителя. На каждой стороне лодочки параллельно и чуть выше ее верхних краев устанавливают два стеклянных регулирующих стержня, удерживающих бумагу таким образом, чтобы она не соприкасалась со стенками камеры. Хроматографическую бумагу разрезают в направлении ее текстуры на полосы достаточной длины и шириной не менее 25 см и не более длины лодочки.

Содержание слайда: В камеру наливают растворитель до образования слоя глубиной 2.5 см, закрывают крышкой и выдерживают в течение 24 ч при температуре от 20 0C до 25 0C Камеру термостатируют при данной температуре в течение всего испытания. Карандашом проводят линию старта на одном конце бумаги, отступив от ее края на такое расстояние, чтобы линия находилась на несколько сантиметров выше регулирующего стержня и была параллельна ему после закрепления конца бумаги в лодочке. Остальная часть листа бумаги должна свободно свисать над регулирующим стержнем. Бумагу помещают в камеру, последнюю закрывают крышкой и выдерживают в течение 1 ч 30 мин. Затем через отверстие в крышке заполняют лодочку растворителем, закрывают отверстие и хроматографируют в течение времени или до расстояния, указанного в частной статье. Бумагу вынимают из камеры и сушат на воздухе. В процессе разделения хроматографическую бумагу защищают от яркого света. В камеру наливают растворитель до образования слоя глубиной 2.5 см, закрывают крышкой и выдерживают в течение 24 ч при температуре от 20 0C до 25 0C Камеру термостатируют при данной температуре в течение всего испытания. Карандашом проводят линию старта на одном конце бумаги, отступив от ее края на такое расстояние, чтобы линия находилась на несколько сантиметров выше регулирующего стержня и была параллельна ему после закрепления конца бумаги в лодочке. Остальная часть листа бумаги должна свободно свисать над регулирующим стержнем. Бумагу помещают в камеру, последнюю закрывают крышкой и выдерживают в течение 1 ч 30 мин. Затем через отверстие в крышке заполняют лодочку растворителем, закрывают отверстие и хроматографируют в течение времени или до расстояния, указанного в частной статье. Бумагу вынимают из камеры и сушат на воздухе. В процессе разделения хроматографическую бумагу защищают от яркого света.

Содержание слайда:

Содержание слайда: Разделение основано на процессах адсорбции, распределения, ионного обмена или их комбинации. Разделение основано на процессах адсорбции, распределения, ионного обмена или их комбинации. Сорбенты в порядке возрастания адсорбционной силы:

Содержание слайда: Полярные сорбенты (гидрофильные) лучше адсорбируют вещества из неполярных, а неполярные лучше из полярных. Полярные сорбенты (гидрофильные) лучше адсорбируют вещества из неполярных, а неполярные лучше из полярных. Полярные сорбенты лучше адсорбируют из растворов те вещества, которые больше содержат полярных групп, и тем сильнее, чем выше степень их ненасыщенности. Адсорбционная способность соединений, содержащих функциональные группы, увеличивается в ряду: CH=CH<OCH3<COOR<C=O<CHO<SH<NH2<OH<COOH Адсорбируемость веществ на том или ином сорбенте во многом зависит от растворителей. Лучшим является тот, который сам обладает очень малой адсорбируемостью на данном сорбенте.

Содержание слайда: Методика. Хроматографирование проводят в предварительно насыщенных камерах вертикальным или горизонтальным элюированием. В случае двумерной хроматографии пластинку сначала хроматографируют в одном направлении, а затем после высушивания – во втором направлении, перпендикулярном первому. При необходимости проводят предварительную подготовку пластинок – перед использованием пластинки либо промывают путем хроматографирования в подходящем растворителе, либо активируют в термостате при температуре от 100 до 105 градусов в течении часа.

Содержание слайда: Методом ТСХ определяют: Идентифицируемые примеси – сравнивают пятна регламентируемых примесей на хроматограммах испытуемого раствора и растворов сравнения; Типичная регламентация содержания примеси выглядит в этом случае следующим образом: «На хроматограмме испытуемого раствора, кроме основного пятна, допускается наличие дополнительного пятна, расположенного на уровне пятна на хроматограмме раствора сравнения и не превышающего его по величине и интенсивности поглощения или окраски (... %)».

Содержание слайда: Общее содержание примесей – если они не токсичны. Метод внутренней нормализации – в качестве раствора сравнения – раствор самой испытуемой субстанции различной концентрации. Общее содержание примесей – если они не токсичны. Метод внутренней нормализации – в качестве раствора сравнения – раствор самой испытуемой субстанции различной концентрации. «На хроматограмме испытуемого раствора любое пятно, кроме основного пятна, не должно превышать по величине и интенсивности поглощения или окраски пятно на хроматограмме раствора сравнения (... %)».

Содержание слайда: Хроматографическая система считается пригодной, если: На хроматограмме раствора сравнения, используемого для проверки пригодности хроматографической системы, четко делятся пятна указанных в частной статье веществ; Rf основного пятна на хроматограмме испытуемого раствора должно быть около величины, указанной в частной статье; На хроматограмме раствора сравнения, используемого для проверки чувствительности хроматографической системы, должно быть четко видно пятно.

Содержание слайда: Преимущества тонкослойной хроматографии:

Содержание слайда: Использованная литература. Государственная фармакопея РК от 2008 года