Презентация Ферментативный микроанализ. Использование в микроанализе ферментных электродов. (Лекция 6) онлайн
На нашем сайте вы можете скачать и просмотреть онлайн доклад-презентацию на тему Ферментативный микроанализ. Использование в микроанализе ферментных электродов. (Лекция 6) абсолютно бесплатно. Урок-презентация на эту тему содержит всего 21 слайд. Все материалы созданы в программе PowerPoint и имеют формат ppt или же pptx. Материалы и темы для презентаций взяты из открытых источников и загружены их авторами, за качество и достоверность информации в них администрация сайта не отвечает, все права принадлежат их создателям. Если вы нашли то, что искали, отблагодарите авторов - поделитесь ссылкой в социальных сетях, а наш сайт добавьте в закладки.
Оцените презентацию от 1 до 5 баллов!
- Тип файла:ppt / pptx (powerpoint)
- Всего слайдов:21 слайд
- Для класса:1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11
- Размер файла:584.50 kB
- Просмотров:76
- Скачиваний:0
- Автор:неизвестен
Слайды и текст к этой презентации:
№1 слайд
Содержание слайда: ФЕРМЕНТАТИВНЫЙ МИКРОАНАЛИЗ.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В МИКРОАНАЛИЗЕ
ФЕРМЕНТНЫХ ЭЛЕКТРОДОВ
№2 слайд
Содержание слайда: Ферментативный микроанализ
Ферменты используются для обнаружения и количественного определения различных веществ:
Металлов (Ag, Cu, Hg, Zn и т. д)
Органических и неорганических соединений
Мутагенов
Канцерогенов
Метаболитов
Детекция количеств, недоступных определению с помощью большинства физико-химических методов.
Методы детекции: электрохимический, спектрофотометрический,флуоресцентный, биолюминесцентный.
№3 слайд
Содержание слайда: Почему используют Е в ферментативном микроанализе
Специфичность по отношению к S (определение S в многокомпонентной смеси, без ее предварительного разделения на составляющие)
Высокая каталитическая активность
(катализируют реакции химического превращения субстрата даже при его низких концентрациях, можно определять микроколичества вещества).
Ферментативный микроанализ простой и быстрый (не надо разделять смеси или концентрировать анализируемый образец, высокая скорость биокатализа)
Многообразие веществ, которые определяются (либо субстраты, либо его эффекторы)
№4 слайд
Содержание слайда: Ферментативный микроанализ
Пример:
Щелочной фосфатазы используется для детекции нг количеств бериллия.
Алкогольдегидрогеназа - ионы серебра (10пг/мл).
Пероксидаза и уреаза - ртуть.
Холинэстераза или карбоксилэстераза - фосфорсодержащие пестициды определяют п
Бактериальная люцифераза -инсектициды (ДДТ, пентахлорфенол).
№5 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа
А→P
Начальная скорость этой реакции ϑ0 пропорциональна концентрации исходного вещества [А].
ϑ0=κ[А],
где κ–константа скорости реакции.
Чем выше концентрация вещества [А], тем больше ϑ0
Концентрацию вещества А определяют с помощью предварительно построенного калибровочного графика, отражающего зависимость ϑ0 от [А]).
№6 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа
Ферментативную реакцию останавливают через определенное время. Зная концентрацию А и измерив концентрацию образовавшегося Р, можно построить калибровочный график, описывающий зависимость [Р] от [А].
Пределы обнаружения анализируемых соединений определяются не только каталитической активностью фермента, но и другими кинетическими параметрами индикаторной реакции.
№7 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа при определении концентрации S
E + S ↔ES →P + E
где Е – фермент, S – субстрат, ES – фермент-субстратный комплекс, Р –продукт.
При [E] << [S]0 начальная стационарная скорость такого рода реакции описывается уравнением Михаэлиса–Ментен
№8 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа при определении концентрации S
Согласно уравнению Михаэлиса–Ментен, концентрация субстрата [S]0 будет пропорциональна v0 только при условии, когда [S]0 << Km.
Верхняя граница определения [S] ограничена величиной Km.
Нижняя граница зависит от чувствительности метода регистрации.
№9 слайд
Содержание слайда: Зависимость скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата
№10 слайд
Содержание слайда: Уравнение Лайнуивера-Бэрка
№11 слайд
Содержание слайда: Константа Михаэлиса
Константа Михаэлиса хар-т сродство фермента к субстрату и не зависит от концентрации фермента.
У какого фермента сродство к субстрату выше? =)
№12 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа при определении эффекторов.
№13 слайд
Содержание слайда: Конкурентное ингибирование
№14 слайд
Содержание слайда:
№15 слайд
Содержание слайда:
№16 слайд
Содержание слайда:
№17 слайд
Содержание слайда: Кинетическая основа ферментативного микроанализа при определении эффекторов.
Верхняя граница детектируемых концентраций обратимых ингибиторов определяется величиной ki.
Взаимодействие с ферментом обратимых неконкурентных ингибиторов можно описать в
виде следующей схемы:
E + I →EI
где I – ингибитор, ki = [EI]/([E][I]).
№18 слайд
Содержание слайда: Необратимое ингибирование
Наблюдается в случае образования ковалентных стабильных связей между молекулой ингибитора и фермента. Чаще всего модификации подвергается активный центр.
Пример:
Ионы тяжелых металлов (ртути, серебра, мышьяка), которые в малых концентрациях блокируют сульфгидрильные группы активного центра.
Аспирин (противовоспалительный нестероидный препарат) –ингибирует фермент циклооксигеназу, катализирующий реакцию образования простагландинов.
№19 слайд
Содержание слайда: Для необратимых ингибиторов:
E + nI → Ei
Уменьшение активности фермента Δ[E] будет пропорционально концентрации ингибитора:
Δ[E] = n[I], где n – число молекул ингибитора, взаимодействующих с одной молекулой фермента.
№20 слайд
Содержание слайда: Использование в микроанализе сопряженных ферментативных систем:
Использование сопряженных ферментативных систем увеличивает чувствительность микроанализа.
В живой клетке многие ферментативные процессы тесно взаимосвязаны между собой, т. е. P одной реакции является S другой.
№21 слайд
Содержание слайда: Использование в микроанализе сопряженных ферментативных систем:
Надо измерить содержание сахарозы в опытном образце.
1. сахароза → глюкоза + фруктоза (Е-сахараза)
2. глюкоза + О2+Н2О → глюконовая кислота + Н2О2
(Е- глюкозооксидаза)
Для определения содержания пероксида можно использовать полярографический метод
Или
3. Н2О2 + о-дианизидин → окрашенный продукт
(Е-перосидаза)
Чувствительность анализа повышается в 100–1000 раз
Скачать все slide презентации Ферментативный микроанализ. Использование в микроанализе ферментных электродов. (Лекция 6) одним архивом:
