Оцените презентацию от 1 до 5 баллов!
Тип файла:
ppt / pptx (powerpoint)
Всего слайдов:
17 слайдов
Для класса:
1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11
Размер файла:
434.00 kB
Просмотров:
50
Скачиваний:
0
Автор:
неизвестен
Слайды и текст к этой презентации:
№1 слайд![Московский педагогический](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img0.jpg)
Содержание слайда: Московский педагогический государственный университет
Биолого-химический факультет
Кафедра биоорганической химии и биотехнологии
Воздействие нейропептидов семакс и PGP на содержание транскриптов гена Cplx2 в головном мозге крыс в условиях экспериментальной ишемии
Работу выполнила Куриченкова Екатерина Олеговна,
6 курс заочного отделения.
Научные руководители: д.б.н., профессор Кутузова Н.М., к.б.н., н.с. Отдела молекулярных основ генетики человека ИМГ РАН
Ставчанский В.В.
№2 слайд![ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНСУЛЬТ](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img1.jpg)
Содержание слайда: ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНСУЛЬТ
ИШЕМИЧЕСКИЙ ИНСУЛЬТ
Ишемический инсульт является повреждающим фактором, нарушающим функционирование мозга и заметно влияющим на экспрессию генов в головном мозге. Нарушения при ишемическом инсульте провоцируются резким ухудшением мозгового кровотока, влекущим за собой:
1. кислородную и глюкозную недостаточность,
2. как следствие (1) – нарушение протекания ОВР в клетке и падение уровня АТФ,
3. как следствие (2) – нарушение работы ионных каналов,
4. изменение внутриклеточной среды,
5. изменения на уровне повреждённых тканей,
6. гибель нейронов.
Поиск новых подходов для лечения ишемии остаётся актуальной проблемой.
№3 слайд![Глутамат-кальциевый каскад](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img2.jpg)
Содержание слайда: Глутамат-кальциевый каскад
Глутамат-кальциевый каскад
Ключевой механизм развития ишемического повреждения – глутамат-кальциевый каскад, в ходе которого нарушается функционирование ионных каналов, происходит массивный приток Na+ и Ca2+ в клетку, а из клетки высвобождаются возбуждающие аминокислоты, в первую очередь глутаминовая. Под её влиянием ионы кальция, продолжая прибывать извне, высвобождаются и из внутриклеточных депо. Это, во-первых, усиливает экзоцитоз, в том числе глутамата, а во-вторых, активирует (через связывание кальция с кальмодулином) гидролитические ферменты, разрушающие компоненты клетки.
№4 слайд![КОМПЛЕКСИНЫ КОМПЛЕКСИНЫ](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img3.jpg)
Содержание слайда: КОМПЛЕКСИНЫ
КОМПЛЕКСИНЫ
Комплексины относятся к числу цитозольных белков, специфичных для нервной ткани и регулирующих процесс экзоцитоза путём взаимодействия с белковым комплексом SNARE, обеспечивающим высвобождение синаптических пузырьков в синаптическую щель. В связи с этим комплексины интересны как возможные участники процессов глутамат-кальциевого каскада.
№5 слайд![Альтернативные транскрипты](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img4.jpg)
Содержание слайда: Альтернативные транскрипты гена Cplx2
Альтернативные транскрипты гена Cplx2
У крыс обнаружено два варианта транскриптов гена Cplx2 – Cplx2_v1 и Cplx2_v2, различающиеся 5’-концевыми участками (ген имеет альтернативные промоторы). Ген Cplx2 человека также имеет два варианта транскриптов, обладающих высоким сходством с соответствующими транскриптами крыс. Факторы, определяющие транскрипцию по тому или иному пути, до конца не выяснены.
Рис. Структурная
организация гена
Cplx2 человека
№6 слайд![СЕМАКС И PGP СЕМАКС И PGP](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img5.jpg)
Содержание слайда: СЕМАКС И PGP
СЕМАКС И PGP
Семакс – нейропротекторный препарат, относящийся к числу регуляторных пептидов (Met-Glu-His-Phe-Pro-Gly-Pro). N-конец пептида содержит модифицированный фрагмент АКТГ (4-7), а C-конец содержит мотив Pro-Gly-Pro (PGP), задерживающий процесс деградации семакса. Также трипептид PGP обладает самостоятельным регуляторным действием.
№7 слайд![Цели и задачи исследования](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img6.jpg)
Содержание слайда: Цели и задачи исследования
Цели и задачи исследования
С целью исследования изменения экспрессии гена Cplx2 поставлены следующие задачи:
Проанализировать качество препаратов тотальной РНК, выделенных из мозга экспериментальных животных, синтезировать на их основе препараты кДНК.
При помощи метода ОТ-ПЦР оценить изменение относительного содержания альтернативных транскриптов гена Cplx2 в лобных долях коры и в подкорковых структурах головного мозга крыс в результате дейсвия фокальной ишемии, а также введения семакса и PGP.
№8 слайд![Схема эксперимента](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img7.jpg)
Содержание слайда: Схема эксперимента
№9 слайд![Схема участков головного](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img8.jpg)
Содержание слайда: Схема участков головного мозга крыс, в которых исследовали изменение транскрипции после необратимой окклюзии левой средней мозговой артерии.
IC - лобно-теменная доля коры ипсилатерального полушария мозга;
CC - лобно-теменная доля коры контралатерального полушария мозга;
IS - подкорковые структуры ипсилатерального полушария мозга;
CS - подкорковые структуры контралатерального полушария мозга
№10 слайд![Проверка качества препаратов](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img9.jpg)
Содержание слайда: Проверка качества препаратов тотальной РНК
Проверка качества препаратов тотальной РНК
№11 слайд![Подбор праймеров Подбор](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img10.jpg)
Содержание слайда: Подбор праймеров
Подбор праймеров
№12 слайд![Real-time PCR Sybr Green I](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img11.jpg)
Содержание слайда: Real-time PCR (Sybr Green I)
Подбор праймеров,
Подбор условий для проведения ПЦР в реальном времени (концентрация кДНК, температурный профиль реакции),
3. Определение эффективности PCR и оценка уровня относительной экспрессии с помощью программы REST (relative expression software tool),
4. Обработка полученных данных с использованием программы REST.
№13 слайд![Динамика изменений](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img12.jpg)
Содержание слайда: Динамика изменений относительного содержания мРНК гена Cplx2 у крыс, подвергнутых фокальной ишемии
№14 слайд![Динамика изменений](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img13.jpg)
Содержание слайда: Динамика изменений относительного содержания мРНК гена Cplx2 в коре головного мозга крыс с фокальной ишемией, вызванных применением семакса и PGP
№15 слайд![Динамика изменений](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img14.jpg)
Содержание слайда: Динамика изменений относительного содержания мРНК гена Cplx2 в подкорке головного мозга крыс с фокальной ишемией, вызванных применением семакса и PGP
№16 слайд![Выводы . Подготовлена панель](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img15.jpg)
Содержание слайда: Выводы
1. Подготовлена панель образцов кДНК для анализа экспрессии генов в условиях экспериментальной ишемии головного мозга крыс и воздействия пептидов семакс и PGP.
2. Под воздействием ишемии относительное содержание транскриптов гена Cplx2 в коре головного мозга спустя сутки после окклюзии снижается в 2 раза. При этом влияния ишемии на содержание мРНК гена Cplx2 в подкорковых структурах не обнаружено.
3. В условиях фокальной ишемии оба исследуемых пептида вызывают снижение содержания мРНК гена Cplx2 в коре головного мозга крыс спустя 72 часа после окклюзии. Эффект PGP оказывается более выраженным, чем эффект семакса. Влияния препаратов в подкорке не наблюдается.
4. Не обнаружено различий в характере изменений экспрессии альтернативных транскриптов гена Cplx2 в условиях эксперимента.
№17 слайд![Спасибо за внимание!](/documents_6/d4797bc9d3a26385ca02066302ce1428/img16.jpg)
Содержание слайда: Спасибо за внимание!